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引加生物的T7 RNA聚合酶V2采用大腸桿菌表達，序列來源于T7噬菌體的RNA聚合酶基因突變體，具有合成能力強，雙鏈RNA生成量低的特點。該酶具有高度的專一性，在鎂離子存在的情況下，只會以含有T7啟動子序列的單鏈或雙鏈DNA為模板（5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’），以NTP為底物，合成與啟動子下游單鏈DNA互補的RNA。雙鏈線性平末端或5’突出末端DNA均可作為T7 RNA 聚合酶的底物模板，因此線性質粒、PCR產物均可用作體外合成RNA的模板。 

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